通過血液細胞分析儀對血液流1s-1的研究
加入時間:2011-12-23 16:27:20 當前新聞點擊率:5021
普朗醫療器械公司科普 通過血液細胞分析儀研究,血流流1s-1的重要性已經被越來越多的醫院所重視,但目前市場上很少見到真正能做到低切變率1s-1的粘度計。許多醫院誤信了推銷員的夸大其辭,所購儀器不能提供真實、可靠的1s-1數據。在此,有必要向用戶提供一些鑒定真偽的方法,以使用戶及廣大患者避免不必要的經濟損失及誤診的發生。
首先請切記:實測1s-1的流變儀,它的結構設計應符合公認的測粘原理和科學的計算公式,否則,其質量和使用價值都是不可信的粘度(η)=切應力(τ)/ 切變率(r),請注意公式中的切應力(τ),也稱剪切應力,切變應力。對于人體切應力來源于心臟的收縮功能;通過體外診斷試劑對于毛細血管粘度計,該力來源于液層高度;對于旋轉式粘度計,來源于轉速。那么好,請計算您即將購買的粘度儀,它的切應力是否達到1s-1時的要求。即粘度一定、切變率設1s-1時,切應力等于粘度值。請檢查廠家文件,切應力技術指標是否滿足范圍。國際血液學標準化委員會要求,切應力范圍10~1000mPa。
例:粘度油12.28mPaS切變率1s-1 , 此時切應力為12.28mPa,如切應力大于該數據則儀器切應力技術指標達不到實測量1s-1的要求。
其二:在不同切變率下,測試標準油粘度。尤其低切1s-1時檢測標準油粘度,低切1s-1時的誤差,直接反映了該儀器在1S-1時的參數修正,直接危害患者1s-1粘度的真實性。儀器只有在各個切變率下都能測準標準油,才有可能測準全血粘度。
其三;加入本構方程參數的粘度計測粘時,高、中切值高時,低切才高。而血液粘度告訴我們:高切反應紅細胞變形性,低切反映紅細胞聚集性;大量臨床實踐也證明:許多低切高的病人高切是正常的。因此,采用本構方程推算1S-1粘度,可造成大量高切正常低切異常的病人漏診、誤診。
其四:調整血球壓積鑒定法:理論上壓積高,全血粘度也會升高。溫度37OC時,壓積每提高5個單位,觀察1s-1時的粘度變化。如是真實數據應變化靈敏,重復性好,反之為模擬數據。
◆細胞聚集性測定方法及其應用
紅細胞聚集性是血液非牛頓流動性的重要原因之一,它對于低切變率下的流動性有極大的影響。因此,在血液微流變學的血液細胞分析儀研究中,紅細胞的聚集性倍受人們重視,其重要性可與紅細胞的變形能力相當。
第一節 紅細胞聚集性的粘度測定法
一、 原理
由于在低切變率下紅細胞會形成為緡錢狀的聚集體,這些網狀聚集使血液內部出現了立體結構,因而其流動時的阻力增大。換言之,低切變率下的紅細胞聚集使血液粘度升高,其升高程度與聚集程度之間呈正相關。這就是粘度測定可以評價紅細胞聚集性的基本原理。
二、方法
1、 低切變率下的血液相對粘度法
根據最近國際上推薦的方法,低切變率下的血液相對粘度可以評價紅細胞聚集指數,即ηrel=ηb /ηp ,其中ηrel為相對粘度,ηb為血液粘度,ηp為血漿粘度。測定最好在37℃下進行,切變率可選1S-1,或與此接近的狀況。
2、 血液粘度測定法之二—— 紅細胞聚集指數R法
本方法由加拿大Brooks提出。他認為在一定切變率下血液的表觀粘度與能量耗散率有正比關系,存在紅細胞聚集體的懸浮液的能耗高于沒有聚集體的細胞懸浮液。因此,聚集與無聚集的細胞懸浮液的表觀粘度比值,應當能給細胞聚集程度提供一種度量。為此,他提出紅細胞聚集指數R,定義為;R= (η/η0)dex /(η/η0)sal 其中。(η/η0)dex為紅細胞懸浮于一定分子量的葡聚糖溶液的相對粘度(η0為葡聚糖溶液的粘度),(η/η0)sal為紅細胞懸浮于生理鹽水—EDTA溶液中的濃度。不言而喻,兩種細胞懸浮液的壓積應當相同,例如均選定30%的細胞壓積。R的數值與若干因素有關,例如葡聚糖的濃度、切變率的高低,Brooks曾做過一系列血液細胞分析儀實驗,我們選其中有代表性的一項,在葡聚糖的濃度為1—8g/100mL及切變率為0.27 S-1——107.5S-1范圍內,聚集指數R一般呈現先升后降的趨勢,并在葡聚糖濃度為3—4g/100mL處出現一個峰值。R值與切變率的關系也很明顯,在較低的切變率下,R值較大,這反映了低切變率下紅細胞聚集程度較高的事實。在高切變率下R值小于1,這是由于此時已不存在細胞聚集;另外,葡聚糖溶液作為懸浮劑本身要比生理鹽水-EDTA粘度大。
由上可見,為了能評價紅細胞聚集程度,我們應該選擇那些細胞聚集—解聚共存的條件,也就是較低的切變率與合宜的葡聚糖濃度。例如在1s-1 左右的切變率,以及3g/100ml的葡聚糖濃度。
(1) 準備有關的懸浮劑
配制生理鹽水—EDTA溶液,濃度為0.15mol/L NaCl,5mmol/L NaHCO3及1mmol/L Na2EDTA。配制葡聚糖溶液,濃度為1—8g/100mL,葡聚糖分子量為70000。
(2) 制備兩種紅細胞懸浮劑
用離心洗脫血漿的方式,分別制備紅細胞的生理鹽水—EDTA溶液懸浮液及相應的葡聚糖懸浮液,一般應加懸浮劑離心洗脫三次。最終的紅細胞壓積可調節至30%。
(3) 測定紅細胞懸浮液的表觀粘度
采用旋轉式粘度計在低切變率下(例如1s-1)測定兩種紅細胞懸浮液于37℃(或25℃)下的表觀粘度。
(4) 測定兩種懸浮劑本身的粘度
用毛細管粘度計分別測定兩種懸浮劑的粘度,測定溫度為37℃(或25℃)。
(5) 計算紅細胞聚集指數
根據上述測定結果,用公式計算聚集指數R。
測定方法與儀器選擇
紅細胞聚集性不是一個物理學參量,它同液體的比重、溫度等物理量不同,后者不論用什么儀器或裝置來衡量,最后都可用一個量綱去描寫,并且得到的數值也應相同(實際上由于系統誤差等因素的影響,不同方法測出的數值只能相近)。正因為如此,我們才可以用不同的方式去描寫紅細胞的聚集程度,在粘度法中用比粘度(無量綱),在細胞沉降法中用沉降率(mm/h),在形態學方法中用Lamda,d(Heyn),在光密度法中用透光率,等等。任何一種方法的測定結果對紅細胞聚集程度的評價上有其共性,它們之間應當有正相關。
值得提出的是,要根據實驗目的與設備條件兩個因素來選用測定方法。如果主要目的是醫學臨床檢驗,可能紅細胞沉降率最為簡易;如果實驗需要了解紅細胞聚集的全過程,則可能以形態學方法和光密度方法為佳。如果已經購置了旋轉式粘度計,而性能上又能進行低切變率(切變率可選1s-1,或與此接近的切變率)的血液粘度測定,則應以粘度法為該實驗室的首選測定紅細胞聚集法。因為,這樣不僅充分發揮了儀器功能,節省了不必要的添置,而且粘度法與血液的流動性聯系最密切,直接把紅細胞聚集性對血流的影響反映出來。
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