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全波段酶標儀采用酶聯免疫吸附試驗的基本原理
加入時間:2016-08-22 10:12:27  當前新聞點擊率:2636

近年來,國內食品安全問題頻出,從“瘦肉精事件”到“三氯氰胺事件”、“蘇丹紅事件”再“塑化劑事件”等等。這些事件的發生使得酶標儀開始走進人們的視野,不少地區的菜場都開始陸續配備此款醫療器械,常用為全波段酶標儀。那么全波段酶標儀采用酶聯免疫吸附試驗的基本原理是什么呢?

全波段酶標儀采用酶聯免疫吸附試驗的基本原理如下:

將過量特異抗體(或抗原)事先包被于載體(酶標板)上,通過抗原抗體反應使待側物質(抗原或抗體)和酶標記物(用HRP-辣根過氧化物酶標記的抗體或抗原)也結合在載體上(固相分離),經洗滌去除游離的酶標記物后,加入底物,已經結合在載體上的標記酶促使底物顯色。利用光電比色法,對待測物進行定性判斷或定量測定。

此法檢驗靈敏度可以達到ng/ml水平。臨床樣本是血清。

包被酶標板:將特異抗原溶液加入酶標板孔內,4℃過夜。然后用洗滌液洗滌3-5次(手洗或洗板機進行洗板),這樣溶液中的特異抗原被牢固吸附在酶標板的微孔表面,形成固相抗原,殘液及雜質被清洗掉。

全波段酶標儀

(普朗醫療品牌---DNM-9602系列酶標分析儀

加患者樣本液(病人血清),樣本液中如果含有待測抗體,經過溫育反應,則與已包被的抗原產生特異結合,生成包被抗原與待測抗體的復合物,被吸附在酶標板的微孔表面。然后再次進行洗滌,去除殘液及干擾物質。

加酶結合物(特異抗原與酶的結合物),經過溫育反應,生成包被抗原+待測抗體+酶標抗原的三者復合物,同樣被吸附在微孔表面,然后再次洗滌,去除游離的或非特異沾附的酶結合物(洗板)。

加顯色液(底物液,國內常用OPD、TMB兩種顯色底物液,檢驗波長分別為492nm和450nm),約經過10-20分鐘顯色反應,被吸附的復合物中的酶與顯色底物液生成有色溶液。此時,由于游離或非特異吸附的酶已被清除,所以溶液顏色的深淺,僅決定于已與待測物結合的酶的量,因此能真實反映待測物的濃度。被固化的酶越多,顯色越深,說明待測物濃度越大。

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