生化分析儀各個參數介紹
加入時間:2020-05-28 11:38:31 當前新聞點擊率:2179
目前大多數生化分析儀為開放式,封閉式的儀器一般也會另外留一些檢測項目的空白通道由用戶自己設定分析參數,因此我們有必要了解生化分析儀各個分析參數的基本含義以及設置方法。
恰當設置各種分析參數是使用好生化分析儀極重要的部分之一,也是操作者能否正確控制儀器完成一系列復雜而有序的操作程序的關鍵,作為新世紀的檢驗工作者,我們有必要掌握這些技術。 常以項目的英文縮寫來設置,如總蛋白設置為TP,白蛋白設置為ALB等。 2.方法類型 生化分析儀常用的方法有終點法、連續監測法、比濁法等,根據被檢物質的檢測原理等選擇其中一種分析方法。 3.反應溫度 自動生化分析儀通過溫度控制系統保持溫度恒定,以保證反應的正常進行,其保持恒溫的方式有三種:干式恒溫器加熱、水浴式循環加熱、恒溫器循環間接加熱。 4.反應波長 當測定體系中只有一種組分或混合溶液中待測組分的吸收峰與其他共存物質的吸收波長無重疊時,可選用單波長,如果待測物質有幾個吸收峰,可選用吸光度較大的一個波長,或者選擇在吸收峰處吸光度隨波長變化較小的某個波長。 5.反應方向 有正向反應和負向反應兩種,反應過程中吸光度增加為正向反應,吸光度下降為負向反應。 6.樣品量與試劑量 樣品與試劑量的確定一般按照試劑說明書上的比例,并結合儀器的特性進行設置,亦可根據手工法按比例縮減或重新設計,但要考慮到檢測靈敏度、線性范圍,盡可能將樣品稀釋倍數大些,以降低樣品中其他成分的影響。 7.分析時間 分析時間包括孵育時間、延遲時間、監測時間等,選擇不同的分析方法應選擇相應的分析時間。 8.計算因子(F值)和實測F值 用連續監測法進行酶活性測定時,不需作標準管或標準曲線,根據摩爾吸光系數很容易進行酶活性濃度的計算。 9.線性度 是非線性比率的界線,常用%表示,其計算公式為,式中:k1為連續監測時間2/3內前讀數時間的斜率,k2為后2/3讀數時間的斜率,k3為總的斜率,一般設置為15%。 10.底物耗盡限額 選擇連續監測法或兩點終點法時設置,不同型號分析儀的設計不一樣,有的為零點與監測首點吸光度的差額,有的為吸光度上升或下降至指定吸光度(MAX-OD/MIN-OD)的數值。 11.試劑吸光度上限、下限 試劑吸光度上限為正向反應用,可參考試劑盒說明書數值折算成所用比色杯的光徑。 12.線性范圍 試劑盒的線性范圍與試劑質量、反應時試劑/樣品比有關,應實檢測劑盒的線性范圍。 13.校正方法 儀器內的設置的校正方法一般包含二點校正、多點校正、非線性校正等。二點校正是指用一個濃度的標準品和一個試劑空白進行校正的方法,該法要求反應必須符合朗伯-比爾定律,即標準曲線呈直線。 14.線性回歸方程 用于校準不同分析方法間測定結果的一致性,在定標后即可求得,有斜率和截距兩個參數,a為曲線在縱軸上的截距,b為曲線的斜率。 上一篇:
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