磁珠法核酸提取儀的兩種檢測方法介紹,哪種方法效果更好
加入時間:2021-01-11 16:21:44 當前新聞點擊率:2330
全自動核酸提取儀是用來自動完成樣本核酸的提取工作的醫療設備,對比傳統的手工提取核酸。全自動核酸提取儀只需在配套的試劑盒加入需要提取的樣本,將試劑盒放核酸提取儀中,運行儀器自帶編輯好的程序,15-60min便可完成一輪樣本核酸提取工作。目前大部分的全自動核酸提取儀都是采用磁珠法的提取原理,下面,小編就給大家具體介紹一下磁珠法提取核酸。 磁珠法提取核酸是通過細胞裂解液裂解細胞,利用磁珠在高鹽低PH值下吸附核酸,在低鹽高PH值下與核酸分離的原理,從細胞中游離出來的核酸分子被特異的吸附到磁性顆粒表面,而蛋白質等雜質不被吸附而留在溶液中。反應一定時間之后,再在磁場作用下,使磁性顆粒與液體分開,回收顆粒(即磁珠-DNA 混合物),再用洗脫液洗脫即可以得到純凈的DNA。
磁珠法核酸提取儀一般分為抽吸法和磁棒法兩種: 抽吸法,也叫做移液法,是通過自動移液裝置來進行。以磁珠法核酸提取儀為例,可通過自動移液裝置來加入裂解液、磁珠吸附;抽走溶液,加入漂洗液,磁珠吸附,抽走漂洗液,加入洗脫緩沖液。由于抽吸法存在去除廢液的時候不抽走磁珠,移液器不能靠磁珠太近,以防磁珠連同廢液被抽掉的問題,影響洗脫效率和純度。 磁棒法原理是在進行核酸提取時,將樣品加入深孔板中進行裂解,將帶磁性的分離設備浸入液體,通過磁場作用使混合物中能被磁性吸引的顆粒集中在分離設備表面,此后的洗雜過程由磁棒轉移帶有核酸的磁珠在不同的深孔板中完成,這種方案提取的核酸鹽分殘留低,純度更高,并且不會出現堵柱子和槍頭的情況。 簡而言之,抽吸法和磁棒法的原理都是一樣的,不同的是磁珠和液體分離的方式。抽吸法是通過固定磁珠、轉移液體來實現核酸的提取,而磁棒法是通過固定液體,轉移磁珠來實現核酸的分離,通過磁棒對磁珠的吸附將磁珠從廢液中分離開,放入下一步的液體中,實現核酸的提取。 |