除了磁珠法提取核酸,現在的核酸提取還用到什么方法
加入時間:2021-01-14 14:16:14 當前新聞點擊率:2090
核酸檢測流程主要包括標本采樣、核酸提取、PCR檢測等步驟,在新冠疫情的檢測中,通過采集被檢測人員的鼻咽拭子,然后將樣本送去核酸檢測實驗室,進行樣本核酸提取和檢測,其中核酸提取則是連接初始采樣與PCR檢測的關鍵步驟,值得重視,那么,核酸提取的方法有哪些呢? 早期的核酸提取方法包括酚抽提法、堿裂解法、CTAB抽提法、煮沸法等。但是由于使用了苯酚、氯仿等有毒揮發性試劑、核酸的回收率較低,損失量大、操作步驟復雜等缺點已經被。 新技術取代,核酸提取目前主要采用的方法有磁珠法和一步法。下面就給大家具體介紹一下這兩種核酸提取方法。
磁珠法提取核酸的原理是核酸與磁珠結合,主要依靠靜電作用、疏水作用和氫鍵作用。細胞或組織在裂解液作用下,其中的核酸DNA/RNA被釋放出來,此時經過表面修飾的納米磁珠即與核酸進行特異性結合,形成“核酸-磁珠復合物”。然后在外加磁場的作用下將復合物分離,經過洗脫非特異性吸附的雜質、去鹽、純化后,得到欲提取的核酸。 另外一種常用的核酸提取方法是一步法,該方法在新冠核酸檢測中也發揮了快速有效的作用。該方法使用核酸釋放劑或裂解液使樣本中的待測物從與其他物質結合的狀態中釋放出來,以便于使用體外診斷試劑或儀器對待測物進行檢測。其提取核酸具有簡便的優勢,整個操作在一個反應管進行,減少操作誤差,提高檢驗結果可重復性。獨特的干擾物封閉機制,分離雜質,純化核酸,避免干擾。適用于設備和專業人員缺少的地區。 隨著冬季的來臨,核酸檢測需求越來越多。臨床對分子診斷、核酸檢測的高通量、自動化要求的不斷增加,傳統核酸提取純化方法操作復雜、提取效率低、不易實現自動化,已不能滿足臨床診斷需求。新型的高科技分離材料和技術被引入,簡便、安全、高效、低成本且適于自動化的核酸分離與醫療設備,將更好的受到臨床的歡迎,更多地應用到各個領域。 |