核酸提取儀是如何操作,檢測方法有哪些?
加入時間:2022-03-09 09:57:19 當前新聞點擊率:979
春季到來,病毒開始活躍,導致疫情開始起伏,因此,利用做核酸來排查出有異常的情況,真正做到有效率的預防。那么,核酸提取儀是如何進行操作呢?有哪些檢測方法。
從核酸采集、轉運、滅活、到提取在到檢測,分別涉及的體外診斷設備分別由:一次性病毒采樣式子、一次性病毒采樣管、樣本保存液、核算提取試劑、核酸提取儀、RT-PCR檢測儀,其中核酸提取儀是應用配套的核酸提取試劑來自動完成樣本核酸提取工作的儀器,應用在疾病控制中心、臨床疾病診斷、輸血安全、法醫學鑒定、環境微生物檢測、食品安全檢測、畜牧業和分子生物學研究等多種領域。 核酸的提取分別為DNA提取和RNA提取,二者的提取原理大致相同,簡單來說分為細胞或者組織的裂解和核酸純化兩大步驟。核酸提取純化方法常用的有酚/氯仿抽提法、離心柱法、磁珠法等。 1.酚/氯仿抽提法 乙烯氯仿提取DNA是利用酚是蛋白質的變性劑,反復抽提,使蛋白質變性,SDS將細胞膜裂解,在蛋白酶K、EDTA的存在下消化蛋白質或多肽或小肽分子,變性降解核蛋白,使DNA從核蛋白中游離出來。 2.離心柱純化 離心柱結構主要是特殊硅基質吸附材料,能特異性吸附DNA,而RNA與蛋白質則會穿過。該方法能選擇性地吸附核酸而不吸附蛋白質及鹽,從而實現核酸與蛋白質及鹽的分離,是目前試劑盒提取廣泛使用的方法。 3.磁珠法 磁珠法是一種固相載體可逆化固定(SPRI)的分離純化方法,主要原理為:在不同濃度的PEG中,會有不同片段大小的DNA吸附在磁珠的羧基修飾層上,這些DNA可以再溶解在水中,以此來洗脫回收。 |