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檢驗生化分析儀常用分析方法(終點法、固定時間法和動力學法)
加入時間:2022-09-19 15:06:48  當前新聞點擊率:1352   標簽:檢驗生化分析儀 

檢驗生化分析儀是用于臨床及專業的化學檢測,它通過對血液、尿液、腦脊液等的分析來測定各種生化指標,并結合其它臨床資料,進行綜合分析,可以幫助診斷疾病,對器官功能做出評價,鑒別并發因子,為疾病的治療提供基礎數據。

檢驗生化分析儀

檢驗生化分析儀常用分析方法共有三大類,分別為終點法、固定時間法和動力學法。

終點法: 

指經過一段時間的反應,反應達到平衡,由于反應的平衡常數很大,可認為全部底物(被測物)轉變成產物,反應液的吸光度不再變化,只與被測物的濃度有關。這類方法通常稱為“終點”法,更確切地說應稱“平衡”法。

單試劑單波長終點法:t1時刻加入試劑(體積為V),t2刻加入樣本(體積為S),然后攪拌并反應,之后開始測量反應液的吸光度,在t3時刻反應達到終點,t3-t2為測定時間。

反應度:R=At3-At2-1×V/(V+S),或R=At3-ARBLK。

其中:Ati為i時刻的吸光度,ARBLK為試劑空白吸光度。

單試劑雙波長終點法:基本上同“單試劑單波長終點法”,只是對于每一個測定周期,其實際吸光度等于Aλ1-Aλ2。

雙試劑單波長終點法:t1時刻加入第1試劑(體積為V1),t2時刻加入樣本(體積為S)之后立即攪拌,t3時刻加入第二試劑(體積為V2) 并立即攪拌,t4時刻反應達到終點。t3-t2為孵育時間,t4-t3為測定時間。

在項目參數中,如果反應起始時間設為0,則反應度R=A時刻吸光度-雙試劑空白吸光度。如果反應起始時間小于0,則反應度R=At4 -雙試劑空白吸光度-t3到t2間設定點的吸光度×(V1+S)/(V1+S+V2)。雙試劑雙波長終點法: 基本上同“雙試劑單波長終點法”,只是對于每一個測定周期,其實際吸光度等于Aλ1-Aλ2。

固定時間法:

又稱為一級動力學法、二點動力學法等,指在一定的反應時間內,反應速度與底物濃度的一次方成正比,即v=k[S]。由于底物在不斷的消耗,因此整個反應速度在不斷的減小,表現為吸光度的變化越來越小。這類反應達到平衡的時間很長,理論上可以在任意時間段進行監測,但由于血清成份復雜,反應剛啟動時反應較復雜,雜反應較多,必需經過一段延遲時間才能進入穩定反應期。

t1時刻加入試劑(體積為V),之后測量試劑空白的吸光度,t2時刻加入樣本(體積為S),t3時刻反應穩定,t4時刻停止對反應進行監測;t2-t3為延遲時間,t3-t4為測定時間。
單波長反應度(單雙試劑相同):R=At4—At3

雙波長反應度:R=(t4時刻主波長吸光度-t4時刻次波長吸光度)--(t3時刻主波長吸光度-t3時刻次波長吸光度)

動力學法:

又稱零級動力學法,指反應速度與底物濃度的零次方成正比,也就是與底物濃度無關。因此,在整個反應過程中,反應物可以勻速地生成某個產物,導致被測定溶液在某一波長下吸光度均勻地減小或增加,減小或增加的速度(ΔA/min)與被測物的活性或濃度成正比。動力學法也被稱為連續監測法;主要用于酶活性的測定。

實際上,由于底物濃度不可能足夠大,隨著反應的進行,底物消耗到一定程度后,反應速度不再為零級,因此,零級動力學法是針對于特定時間段而言的;同樣,由于血清成份復雜,反應剛啟動時反應較復雜,雜反應較多,必需經過一段延遲時間才能進入穩定反應期,各試劑商對這兩段時間有嚴格規定。

t1時刻加入試劑(體積為V),t2時刻加入樣本(體積為S),t3時刻反應穩定,tn時刻停止對反應進行監測;t3-t2為延遲時間,tn-t3為測定時間。單波長反應度(單雙試劑相同)R=(n∑AT-∑A∑T)/[n∑T2-(∑T)2],其中:n=t3到tn間的數據個數 ,T=時間 , A=某一時間的吸光度。雙波長反應度基本同單波長,只是某一時間的吸光度等于主波長吸光度減去次波長吸光度。

如今,檢驗生化分析儀已經走上了快速發展之路,自動化程度更高、分析項目范圍更廣、配置更方便、分析速度更快、維修也更方便。國產檢驗生化分析儀品牌有很多,常見的有普朗醫療、邁瑞、庫貝爾等等,這些都是國內比較常見的生化分析儀。

其中普朗醫療是成立時間較早、售后較為完善的一家醫療器械廠家,檢驗生化分析儀從半自動到全自動多個型號可選擇,公司生產的PUZS-600系列全自動生化分析儀擁有可靠的光學系統;穩定的反應系統;靈活準確的前處理系統;完善高效的的清洗系統;易用便捷的軟件操作系統等優勢。自問世以來,此款設備備受是國內各大研究機構及醫院信賴選。

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