加入時間:2011-12-16 15:17:01 當前新聞點擊率:5460
血液細胞分析儀目前已經成為了一種普遍使用的醫療設備,可以用來做血液檢測,查看紅細胞異常情況。
①紅細胞鹽水滲透脆性試驗。原理:懸浮于等滲鹽水中的紅細胞形態不變,懸浮于低滲鹽水中的紅細胞則發生膨脹,直至破裂、溶血。用不同濃度的低滲鹽水來觀察紅細胞膜的最小抵抗力(開始溶血)和最大抵抗力(完全溶血)。抵抗力增強者稱脆性減低,反之,稱脆性增加。
正常值:開始溶血:0.42~0.46%氯化鈉溶液;完全溶血:0.32~0.34%氯化鈉溶液。
臨床意義:本試驗用于測定紅細胞膜有無異常。滲透脆性增加見于遺傳性球形紅細胞增多癥。
?、诩t細胞機械脆性試驗。原理:紅細胞在體外由于機械性損傷可發生溶血。將抗凝血置震蕩器上按一定頻率和時間震動后測紅細胞溶血的百分率。
正常值:7.5~23.9%。
臨床意義:遺傳性球形紅細胞增多癥的病人,此試驗的溶血百分率均可有不同程度的增高。尤其輕癥遺傳性球形紅細胞增多癥的病人,此試驗比紅細胞鹽水滲透脆性試驗更敏感,有助于診斷。
?、鬯峄视腿芙庠囼灒ˋGLT)。原理:在20~28℃時,正常紅細胞加入酸化甘油后會緩慢溶血而出現光密度下降。當光密度下降為起始光密度一半時所需時間,稱AGLT50。遺傳性球形紅細胞增多癥病人紅細胞的AGLT50較正??s短。
正常值:AGLT50>30分鐘。
臨床意義:此試驗對遺傳性球形紅細胞增多癥的診斷敏感性極高。而其他溶血性疾病無假陽性結果,利于鑒別診斷。
?、茏陨砣苎囼炁c糾正試驗。原理:以無菌的脫纖維血液,于37℃溫育24~48小時,觀察其自然溶血程度(百分率),并加入葡萄糖及 ATP后觀察其溶血程度有無減輕稱為糾正試驗。
正常值:
0.9%氯化鈉 10%葡萄糖
24小時<0.5%?。?.4%
48小時<3.5%?。?.6%
臨床意義:正常人紅細胞經溫育24小時后,不溶血或極輕微溶血。48小時后僅小量溶血。加入葡萄糖后溫育,溶血明顯減慢。由于細胞膜的缺陷所致遺傳性球形紅細胞增多癥病人,自身溶血發生快且明顯。經過血細胞分析儀檢測,因酶的缺陷所致的先天性非球形紅細胞溶血性貧血病人,自身溶血也常增強,而其中Ⅰ型病人,若在實驗中加入葡萄糖或ATP,則溶血明顯減輕,見于葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G-6-PD)缺乏;其Ⅱ型病人,在試驗中加入ATP可使溶血明顯減輕,若加葡萄糖則無效,見于丙酮酸激酶缺乏。可以鑒別不同病因所致的先天性非球形紅細胞溶血性貧血。
?、菟崛苎囼灐T恚赫H思t細胞在自身新鮮血中、弱酸(pH6.6~6.8)條件下,孵育1小時,不發生溶血。而陣發性睡眠性血紅蛋白尿的病人,因紅細胞本身結構異常和紅細胞外因素的影響呈現酸溶血現象。
正常值:陰性。
臨床意義:本試驗陽性見于陣發性睡眠性血紅蛋白尿病人。
?、拚崽牵ㄌ撬┤苎囼?。原理:陣發性睡眠性血紅蛋白尿病人的紅細胞膜有缺陷,當病人的血液懸浮于等滲的10%蔗糖溶液中時,即發生滲誘溶血現象。
正常值:正常人不發生溶血。
臨床意義:幾乎所有陣發性睡眠性血紅蛋白尿病人均可呈陽性反應,故此試驗比酸溶血試驗敏感。但也可在一些其他類型貧血病人呈弱陽性反應。 ⑦紅細胞葡萄糖 -6-磷酸脫氫酶(G-6-PD)活性測定。原理:G-6-PD在催化6-磷酸葡萄糖轉變為6-磷酸葡萄糖酸過程中,使氧化型輔酶Ⅱ(NADP)還原生成還原型輔酶Ⅱ(NADPH)。還原型輔酶Ⅱ在波長340nm處有一吸收峰,故可通過單位時間生成還原型輔酶Ⅱ的量來測定G-6-PD活性。
正常值:4.97±1.43μmNADPH/分鐘/克血紅蛋白。
臨床意義:用于確診G-6-PD的缺乏,因G-6-PD缺乏可致NADPH在單位時間內生成減少。
⑧高鐵血紅蛋白還原試驗。原理:高鐵血紅蛋白須依靠還原型輔酶Ⅱ (NADPH)供氫而還原成還原血紅蛋白。在G-6-PD缺乏時,因NADPH生成減少,故高鐵血紅蛋白的還原少于正常。
正常值:>75%。
臨床意義:G-6-PD缺乏時,高鐵血紅蛋白還原率一般低于30%。此法簡單易行,適用于過篩檢查,但可有假陽性反應。
⑨變性珠蛋白小體檢查。原理:在抗凝血中加入氧化劑乙酰苯肼,經37℃孵育后再用甲紫作活體染色,在G-6-PD缺乏的紅細胞內可出現藍色變性珠蛋白小體。 正常值:含5個以上變性珠蛋白小體的紅細胞占0~28%。在G-6-PD缺乏者平均可達67.8%(45~92%)。
臨床意義:作為檢查G-6-PD缺乏的過篩試驗。但缺乏特異性,也可見于不穩定血紅蛋白病的紅細胞。
?、庋t蛋白電泳。原理:大部分異常血紅蛋白的等電點不同,所以在使用不同緩沖液的電泳中的泳動速度不同,而形成各種不同的區帶。故可由電泳圖形鑒別各類異常血紅蛋白的性質及其含量。
臨床意義:此檢查為診斷地中海貧血及大多數異常血紅蛋白(Hbs、Hbc、HbD、HbH)的可靠方法。
?、箟A血紅蛋白(HbF)測定。原理:血紅蛋白A置于堿性溶液中即發生變性沉淀,且不能通過濾紙。血紅蛋白F對堿有較強的耐力,故用堿變性試驗可測定。
正常值:成人血液中血紅蛋白F的含量不超過2%。
臨床意義:β珠蛋白生成障礙性貧血時,HbF顯著增多,達10%以上。在急性白血病和再生障礙性貧血的病人也可輕度增多。
?、t蛋白H包涵體生成試驗。原理:血紅蛋白H在體外極易變性和沉淀。使用煌焦油藍染色,于37℃保溫15分鐘,能使血紅蛋白 H在細胞中形成大小不等,數量不一,分布不均的深藍色包涵體。
正常值:陰性。
臨床意義:此試驗陽性可診斷血紅蛋白H病。不穩定血紅蛋白亦可呈陽性結果,但須保溫24小時。
?、t蛋白c試驗。原理:血紅蛋白c病的紅細胞中可見棒狀或六角形結晶。當細胞置于3%氯化鈉液中,于37℃溫育1小時后,帶有Hbc的紅細胞內結晶體更易顯出。
臨床意義:此試驗可協助診斷血紅蛋白c病。
?、t細胞鐮變試驗。含有血紅蛋白 s的紅細胞在缺氧的情況下,易發生鐮形變化。用于確診血紅蛋白s病。
?、惐荚囼灐UQt蛋白加入異丙醇孵育于37℃40分鐘后方出現沉淀,而不穩定血紅蛋白孵育5分鐘即可出現沉淀。用于診斷不穩定血紅蛋白,其診斷價值高于變性珠蛋白小體檢查。
免疫性溶血性疾病的抗體檢查 包括以下檢查:
?、倏谷饲虻鞍自囼?。此血球儀試驗系檢查不完全抗體的一種敏感的方法。完全性抗體被紅細胞吸附后與抗原相遇,在生理鹽水中可發生凝集反應。而不完全抗體不能與含有相應抗原的紅細胞發生凝集。不完全抗體致敏的紅細胞表面,吸附有一層不完全抗體(屬于免疫球蛋白IgG),當加入抗人球蛋白的血清后,使致敏紅細胞發生凝集,顯示出不完全抗體的存在??谷饲虻鞍诇y定分直接法與間接法。直接法系檢查紅細胞是否吸附有不完全性抗體,間接法系檢查血清中有否不完全性抗體。
正常值:陰性。
臨床意義:抗人球蛋白試驗呈陽性反應者,見于新生兒溶血病、自身免疫性溶血性貧血、溶血性輸血反應等。
?、诶淠卦囼?。原理:許多人體內含有低效價的冷凝集素(屬 IgM抗體)。在冷凝集素病患者的血清中,其效價明顯增高。冷凝集素是一種可逆性抗體,在低溫時可與自身紅細胞或“O”型紅細胞發生凝集,當溫度增高時,凝集塊又復消失。
正常值:效價為1:8~16。
臨床意義:陽性結果用于診斷冷凝集素病。但有些冷抗體型自身免疫性溶血性疾病亦可呈陽性結果。
?、劾洌瓱崛苎囼灐j嚢l性冷性血紅蛋白尿癥患者的血清中有一種依賴補體的自身雙相溶血素(屬IgG),在0~4℃時,此溶血素與紅細胞結合,并吸附補體,但不溶血。若升溫至30~37℃即發生溶血。
正常值:陰性。
臨床意義:用于確診陣發性冷性血紅蛋白尿癥。
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